脂肪酸是一類一端含有一個羧基的長的脂肪族碳氫鏈的有機物。脂肪酸可以分為飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸,而根據雙鍵位置的不同,不飽和脂肪酸又可分為ω-3, ω-6, ω-9系等等。脂肪酸在有充足氧供給的情況下,可氧化分解為二氧化碳和水,釋放大量能量,是機體主要能量來源之一。脂肪酸β-氧化是體內脂肪酸分解的主要途徑,脂肪酸氧化不但為機體提供了大量的能量,同時也生成了大量的體內化合物合成的中間原料乙酰CoA。脂肪酸在大部分組織中可以徹底氧化生成二氧化碳和水,但在肝臟中,脂肪酸的氧化很不完全,經常生成一些中間代謝產物,如乙酰乙酸、β-羥基丁酸和丙酮等酮體。脂肪酸不僅為營養所必需,而且與兒童生長發育和成長健康有關,還具有降血脂、防治冠心病等治療作用,且與智力發育、記憶等生理功能有一定關系。

在生物樣本中游離脂肪酸僅占總脂肪酸的10%,且其含量低且動態波動范圍較寬,一次性在生物樣本中同時檢測和定量盡可能多的游離脂肪酸是一份比較具有挑戰的分析工作。我們使用GC-MS、LC-MS/MS兩種平臺可定性定量檢測尿液、全血/血清/血漿等生物樣本中的全譜游離脂肪酸,通過檢測游離脂肪酸水平來反映機體的脂質代謝、糖代謝及內分泌功能狀態,對探索疾病的發病機理及防治有十分重要的意義。

1. 采用GC-MS平臺,部分檢測列表如下:

2. 采用LC-MS/MS平臺,部分檢測列表如下:

技術優勢:

  • 高通量絕對定量檢測中長鏈脂肪酸;
  • 游離脂肪酸常用于評估某種狀態下脂肪酸的代謝水平,但因有些游離脂肪酸含量低而動態范圍較寬而增加檢測難度,本方法構建標準品不同線性范圍可定量高低濃度代謝物,同時采用同位素內標校正,確保結果準確性;
  • 本方法著重關注細胞膜與脂質結合的脂肪酸水解后總脂肪酸水平,可以準確反映一段時間內脂肪酸的積累效應,從而判斷脂肪酸的靜態水平。

檢測流程:

樣本數要求:

細胞/微生物樣本每組至少6個生物學重復;

模式動物/植物樣本每組至少10個生物學重復;

臨床樣本一般每組至少50個生物學重復(嚴格控制患者入組條件)。

樣本量要求:

血:100?μL

組織:50?mg

新鮮糞便:50?mg

凍干糞便:5?mg

細胞:1E7

樣本運輸:

干冰運輸,按5公斤/天準備

客戶應用案例:

1) Linjing Zhao, Yan Ni, et al. A panel of free fatty acid ratios to predict the development of metabolic abnormalities in healthy obese individuals. Sci Rep. 2016, 6: 28418. (IF=5.2)

2) Xiaojiao Zheng, Tianlu Chen, et al. The Brain Metabolome of Male Rats across the Lifespan. Sci Rep, 2016, 6: 24125. (IF=5.2)

3) Yan Ni, Linjing Zhao, et al. Circulating Unsaturated Fatty Acids Delineate the Metabolic Status of Obese Individuals. EBioMedicine, 2015, 2(10): 1513-22. (IF=6.68)

4) Xiaojiao Zheng, Yunping Qiu, et al. A targeted metabolomic protocol for short-chain fatty acids and branched-chain amino acids. Metabolomics, 2013, 9(4): 818-27. (IF=3.7)